Papel dos microRNAs na resposta imune mediada por TLRs na infecção por Leishmania amazonensis.

Resumo

A regulação pós-transcricional mediada por microRNAs em processos infecciosos causados por bactérias, vírus e parasitas, assim como de células cancerígenas, vem sendo intensamente estudada nos últimos anos. A infeção promovida por Leishmania também é capaz de modular a expressão de miRNAs e esses regulam genes envolvidos na resposta do macrófago frente ao parasita. A modulação na expressão de miRNAs do macrófago promovida pelo parasita poderia inibir a produção de óxido nítrico (NO) direcionando a L-arginina para produção de poliaminas, através do aumento na expressão da arginase I do hospedeiro, o que resulta na sobrevivência e replicação do parasita. Ainda não foi elucidado como a sinalização mediada pelos receptores Toll-like (TLR) atua no processo de regulação de expressão de miRNAs e mRNAs-alvo em modelos de infecção por Leishmania amazonensis. O projeto está baseado na hipótese de que a expressão de microRNAs do hospedeiro seja modificada durante a entrada e replicação da L. amazonensis no macrófago, sendo mediada pelo reconhecimento através de receptores da imunidade inata, os TollLike Receptors (TLRs), como meio de subverter a resposta imune do hospedeiro. Deste modo, a ativação da sinalização via TLRs modularia a expressão de alguns miRNAs envolvidos no controle pós-transcricional da sinalização intracelular das vias dos receptores da imunidade inata, ou ainda a modulação da expressão de miRNAs regularia a ativação da via dos TLRs. Assim, a modulação dos miRNAs mediada por TLR, ou vice-versa, teria papel funcional na maturação do fagolisossomo, na ativação da produção de citocinas, na ativação da sinalização via NF-kB ou na via de produção de poliaminas/NO (arginase/NOS2). A idéia central deste projeto é investigar se as sinalizações via MyD88, TLR2 ou TLR4 durante a infecção de macrófagos promovem mudanças na composição de miRNAs do hospedeiro induzindo maior capacidade do macrófago em fagocitar e eliminar o parasita. Ainda, entender se a regulação na composição de miRNA devido a alteração na maneira de reconhecer o parasita contribui para a ativação dos macrófagos e resposta imune gerada durante a leishmaniose. Assim, este projeto tem como objetivo central avaliar a expressão de microRNAs em macrófagos oriundos de camundongos nocautes de MyD88, TLR2 ou TLR4 infectados por L. amazonensis e suas implicações na regulação de vias relacionadas a fagocitose, produção de poliaminas e NO e consequente sobrevivência do parasita. Os miRNAs que tiverem sua transcrição alterada e que possuam relevância para as vias estudadas serão utilizados como "candidatos" em estudos de silenciamento de sua expressão e impacto na infectividade. A execução do projeto tem potencial para gerar produtos em forma de artigos científicos e em conferências, para ampla divulgação do conhecimento, bem como formação intelectual e treinamento de alunos da graduação e pós-graduação. Ainda, os dados preliminares indicam a possível identificação e desenvolvimento de marcadores gênicos da infecção por L. amazonensis ou de inibidores específicos das vias descritas no projeto com o objetivo de controlar a infecção. (AU)