Análise do papel de fatores de transcrição e miRNAs na regulação da expressão gênica em macrófagos murinos infectados por Leishmania amazonenses

Resumo

Leishmania é um protozoário parasita causador da Leishmaniose. O parasita alterna seu ciclo de vida entre as formas promastigotas nos hospedeiros invertebrados e as formas amastigotas infectando células fagocíticas do sistema imune nos hospedeiros vertebrados, entre elas os macrófagos. O parasita é capaz de subverter a ativação de mecanismos microbicidas nos macrófagos, em favor da produção de poliaminas via arginase (ARG1), em detrimento da produção de óxido nítrico (NO) pela óxido nítrico sintase 2 (NOS2), enzimas que utilizam a L-arginina como substrato. Respostas imunes contra patógenos intracelulares são orquestradas por diversos mecanismos de regulação que podem ser transcricionais e/ou pós-transcricionais, como por exemplo, pela ação de fatores de transcrição, estabilização de mRNAs ou a partir da ação de miRNAs. Fatores de transcrição são proteínas que se ligam na região promotora de genes alvo ativando ou reprimindo sua transcrição; enquanto miRNAs são pequenos RNAs não-codificadores, que se ligam na porção 3'UTR de mRNAs alvos, diminuindo a tradução das proteínas presuntivas. Assim sendo, a infecção por L. amazonensis pode induzir a expressão tanto de fatores de transcrição indutores ou repressores de genes envolvidos na montagem da resposta inflamatória, quanto de miRNAs que modulariam a expressão gênica. Ainda, pode haver a interação entre ambos os mecanismos de regulação, favorecendo tanto a eliminação do parasita como sua sobrevivência, dependendo da via ativada ou suprimida. Este trabalho tem por objetivo estabelecer o perfil de expressão de miRNAs e fatores de transcrição durante a infecção de macrófagos oriundos de camundongos C57BL/6 com L. amazonensis e analisar a inter-regulação entre ambos os moduladores bem como suas ações na montagem da resposta inflamatória. Ainda, avaliar o papel da NOS2 do hospedeiro e a atividade de arginase do parasita e suas contribuições para a montagem da resposta imune frente à infecção. (AU)