Estudo do Envolvimento dos Circuitos Glutamatérgicos, Endocanabinoides e Endovaniloides do Córtex Pré-frontal Medial no Modelo de Dor Neuropática: Investigação das Comorbidades Dor Crônica e Pânico

Resumo

Devido à escassez de trabalhos que abordem as bases neuroanatômicas e farmacológicas da dor crônica e da participação de áreas corticais como a do córtex pré-frontal medial (CPFM) e suas regiões pré límbica (PR) e infra límbica (IL) em sua modulação, a proposta do presente trabalho será avaliar o possível envolvimento do PL e IL nas vias descendentes que modulam a dor induzida pela injúria por constrição crônica do nervo isquiático (CCNI) no modelo de dor neuropática (DN). Para isso, será investigada a atividade neuronial do PL, do IL e dos núcleos do sistema endógeno de modulação de dor, tais como substância cinzenta periaquedutal (SCP), núcleo magno da rafe (NMgR) e locus coeruleus (LC), através da detecção da proteína c-Fos, seguido por reações imuno-histoquímicas para a identificação de neurônios positivos para receptores glutamatérgicos NMDA, endocanabinoide CB1 e receptor endovaniloide TRPV1, analisando a atividade neuromolecular no 2º, 7º, 14º e 21º dia após a indução da DN pela CCNI. O teste nociceptivo que será utilizado é o de alodínia mecânica, o von Frey, no qual avaliaremos no 2º, 7º, 14º e 21º dia após a indução da DN pela CCNI. Uma vez determinado o envolvimento do CPFM (PL e IL) na modulação da DN induzida pela CCNI por meio da ativação da proteína c-Fos e da presença de receptores NMDA, CB1 e TRPV1 nas áreas de estudo, o próximo passo será investigar a interação farmacológica entre os sistemas endocanabinoide e glutamatérgico no PL e no IL, através do pré-tratamento com microinjeções de doses crescentes de AM-251 (antagonista seletivo de receptores CB1), seguido pela ativação do sistema glutamatérgico com l-glutamato (agonista glutamatérgico); também será realizado o bloqueio do receptor NMDA através do pré-tratamento com doses crescentes de LY235959 (antagonista seletivo de receptores NMDA), seguida pela ativação do endocanabinoide, através da microinjeção da anandamida (agonista endocanabinoide) no PL ou no IL. A interação entre os sistemas farmacológicos endocanabinoide e endovaniloide no PL e no IL também será investigadas através do pré-tratamento do CPFM com microinjeções em doses crescentes de capsazepina (antagonista TRPV1), seguida pela ativação endocanabinoide através do tratamento do CPFM com anandamida; também será realizado o bloqueio dos receptores CB1 do CPFM, seguida pela ativação endovaniloide através da microinjeção de capsaicina (agonista endovaniloide), avaliando-se a DN. E por fim, a incessante busca por um maior entendimento das reações emocionais evocadas frente a estímulos aversivos traz consigo o interesse científico voltado à busca das bases neuroanatômicas e psicofarmacológicas do comportamento que tem sido associado ao medo e ao pânico. Sendo assim, será investigada a comorbidade entre a DN com pânico em roedores com DN que serão submetidos ao confronto agressivo com serpente constritora após sete dias da CCNI. Para estudar o envolvimento do PL e do IL nessa comorbidade, serão utilizadas as mesmas ferramentas farmacológicas já propostas no presente projeto (visando estudar a interação entre os sistemas farmacológicos de interesse) em um modelo experimental de dor neuropática induzida por constrição crônica do nervo isquiático em ratos Wistar.