CONTROLE DA MASSA MUSCULAR PELA VIA DE SINALIZAÇÃO DO AMPc

Resumo

No projeto temático anterior, demonstramos que o sistema nervoso simpático, por meio da ativação dos adrenoceptores beta-2, inibe a atividade do sistema ubiquitina-proteassoma,o principal sistema proteolítico envolvido com a perda de massa muscular. Esse efeito édecorrente da supressão do "programa atrófico" (genes relacionados à atrofia ou atrogenes) eenvolve a participação da via de sinalização do AMPc. No entanto, os mecanismos envolvidos na supressão desses genes e os alvos downstream desse segundo mensageiro no controle da massa muscular ainda não são conhecidos. Portanto, o presente projeto tem comoobjetivo: 1-Investigar o envolvimento das histonas deacetilases e dos co-ativadorestranscricionais de CREB (p300/CBP) na acetilação de Foxo como um mecanismo desupressão dos atrogenes induzido pelos ²2-agonistas; 2-Verificar o papel de PKA/CREB naresposta adaptativa de atenuação da perda de massa em músculos desnervadoscronicamente; 3-Avaliar a possível interação entre a via do AMPc e a da miostatina nocontrole da massa muscular; 4-Investigar os mecanismos antiproteolíticos e vias desinalizações envolvidos com a ação anabólica de outras moléculas que agem por meio doAMPc (CGRP e urocortinas) e 5-Analisar se os mecanismos adrenérgicos de manutenção damassa do tecido adiposo marrom são semelhantes aos da musculatura esquelética. Para isso,utilizaremos métodos bioquímicos e moleculares para a quantificação das atividadesproteolíticas e expressão de genes e proteínas em tecidos e células e implantaremos novastécnicas de biologia molecular in vivo, tais como a manipulação gênica por eletroporação e aanálise da atividade de fatores de transcrição por sistemas de imagem. Dessa forma,poderemos correlacionar o estado de fosforilação ou acetilação com a atividade in vivo de Foxo e o nível de expressão dos atrogenes em músculos de roedores submetidos a diferentes modelos atróficos tratados com beta-2 agonistas ou outras drogas. Para investigar mais detalhadamente a participação das vias de sinalização na ação anti-catabólica mediada pelo AMPc, músculos serão transfectados com as formas dominantes negativas de PKA, CREB,ERK2 ou Akt. Estes resultados poderão contribuir para o desenvolvimento de estratégias terapêuticas de combate à atrofia muscular.