Efeito do imunomodulador P-MAPA associado a interleucina-12 no Câncer de Ovário: abordagens in vitro e in vivo sobre o processo inflamatório e sistema imune

Resumo

O câncer de ovário (CO) apresenta elevada incidência em mulheres pós-menopáusicas e, por apresentar diagnóstico tardio e baixo prognóstico, é a quinta causa mais comum de morte por câncer. O CO responde aos tratamentos convencionais, retardando o crescimento tumoral, porém, muitas mulheres desenvolvem quimioresistência ligada ao processo inflamatório. A interleucina(IL)-12 tem sido administrada em pacientes com tumores sólidos, incluindo o CO, na tentativa de estimular a resposta inflamatória polarizada T helper1 (Th1), com produção elevada de interferon-gama (IFN-g). No entanto, seus efeitos anti-tumorais são limitados. O imunomodulador P-MAPA é um biopolímero produzido pela Farmabrasilis, e tem apresentado efeitos significativos sobre componentes do sistema imunológico, sendo capaz de estimular os receptores celulares Toll-like (TLR2 e TLR4), a produção de linfócitos T, citocinas como a IL-2 e IFN-g, além de promover o aumento da atividade das células natural killers (NK). Portanto, o presente estudo tem o objetivo de avaliar o efeito dos tratamentos funcionais com P-MAPA e IL-12 sobre o processo inflamatório nas células resistentes de carcinoma de ovário humano (linhagem SKOV-3) e sobre o sistema imune ligado ao CO induzido quimicamente em ratas Fischer 344. Para tanto, serão investigados os seguintes parâmetros: monitoramento dos efeitos de diferentes doses de tratamentos e períodos de incubação através da contagem celular, avaliação da viabilidade celular, citotoxicidade, migração/invasão celular e parada do ciclo celular, imunolocalização por fluorescência dos receptores TLR2 e TLR4 e quantificação dos receptores TLR2 e 4, bem como dos fatores imunológicos: fator de diferenciação mielóide (MyD88), fator indutor de IFN-g associado ao domínio TIR (TRIF), fator nuclear relacionado ao interferon (IRF3) e fator nuclear kappaB (NF-kB) envolvidos no processo inflamatório, avaliação através da estratégia proteômica global por electrospray (LC MS-MS) das proteínas/peptídeos secretadas, quantificação dos mediadores do processo inflamatório (pró e anti-inflamatórios) no sobrenadante da cultura através de ensaio multiplex, avaliação dos diferentes tratamentos sobre a histopatologia do CO, imunolocalização e quantificação de TLR2 e 4 bem como fatores imunológicos no CO, quantificação de TCD4+, TCD8+, Tregs, e NKs por citometria de fluxo e ensaio multiplex para os mediadores inflamatórios presente no CO Nossos resultados poderão colaborar no entendimento dos efeitos combinados do P-MAPA e IL-12 nas diferentes respostas oriundas do processo inflamatório e sistema imune associado ao CO. (AU)