Comportamento de células endoteliais submetidas a um modelo de hipertensão arterial in vitro e seu impacto na osteogênese

Resumo

Temos buscado compreender mecanismos parácrinos envolvidos entre células endoteliais e células osteoprogenitoras, com a finalidade de levantar dados sobre o conjunto de mecanismos envolvidos neste contexto. As células endoteliais respondem fenotipicamente à forças mecânicas geradas pelo fluxo sanguíneo, secretando fatores tróficos importantes e que vem sendo relacionados a mecanismos de remodelagem do osso, como proposto por Kusumbe et al. (2014). Neste sentido, nossa proposta será caracterizar as alterações celulares e moleculares promovidas pela hipertensão in vitro, pelo modelo de Shear stress, já padronizado pelo nosso grupo de pesquisa, e verificar seu envolvimento em mecanismos de osteogênese in vitro. Pelo elevado custo médico-social, especialmente por conta de suas complicações, a hipertensão no Brasil é considerada um grande problema de saúde pública, e suas consequências no tecido ósseo são pouco explorados. Para tal, células endoteliais HUVEC serão submetidas ao Shear stress, em condições de hipertensão e serão avaliadas quanto alterações celulares, moleculares (inclusive epigenética) e conteúdo trófico liberado ao meio condicionado. Especificamente, pretendemos: 1. Realizar a caracterização proteômica do secretoma de células endoteliais e muscular; 2. Analisar potenciais vias de transdução de sinais envolvidas com rearranjo dos filamentos de actina; 3. Estimar a influência do modelo em mecanismos de remodelagem da matriz extracelular através da expressão e atividade das metaloproteinases de matriz (MMP2 e MMP9); 4. Determinação de mecanismos epigenéticos através da análise dos níveis de 5meC e 5hmeC. Estabelecer eventos bioquímicos, celulares e ultraestruturais de células endoteliais/musculares, submetidas, ou não, ao modelo de Shear-Stress em condição ou não de hipertensão, será de extrema relevância neste momento para estabelecermos o repertório de proteínas sintetizadas e secretadas em função ao modelo SS, agregando resultados importantes à nossa linha de pesquisa, onde os novos projetos se inserem. Outro fator importante, que merece destaque, será o caráter de formação de recursos humanos, alinhado ao desenvolvimento do nosso grupo de pesquisa aqui na UNESP-Botucatu-SP. (AU)