Development of analytical methods for evaluation of Nile tilapia (Oreochromis niloticus) metalloproteins

• Grant number: 07/59778-0
• Support Opportunities: Regular Research Grants
• Start date: April 01, 2008
• End date: June 30, 2010
• Field of knowledge: Physical Sciences and Mathematics - Chemistry - Analytical Chemistry
• Principal Investigator: Pedro de Magalhães Padilha
• Grantee: Pedro de Magalhães Padilha
• Host Institution: Instituto de Biociências (IBB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brazil
• City of the host institution: Botucatu

Abstract

A determinação de cálcio, cobre, ferro, manganês, selênio e zinco ligados a proteínas de amostras de plasma, tecido hepático e muscular de peixes, tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus), por espectrometria de absorção atômica em chama/forno de grafite (FAAS/GFAAS) após fracionamento das proteínas por eletroforese 2D PAGE, representa o foco principal do trabalho proposto. O estudo de avaliação de metaloproteínas na área nutrição de peixes além de inédito, será um marco inicial na determinação do metaloma da espécie. O trabalho busca otimizar métodos eletroforéticos em 2D para o fracionamento de proteínas nas amostras de plasma e tecidos hepático e muscular de tilápia do Nilo, identificação dessas proteínas por análise das imagens obtidas nos géis de poliacrilamida e a caracterização de algumas proteínas por MALDI-TOF MS. Um estudo de mapeamento por SR-XRF de alguns spots protéicos para identificação qualitativa de íons Ca, Cu, Fe, Mn, Se e Zn será feito em seguida, para então, otimizar procedimentos de extração dos íons metálicos dos spots para quantificação por FAAS/GFAAS. Serão estudadas diferentes formas de preparo das amostras para extração das proteínas e diferentes programas de separação por eletroforese 2D PAGE. Na determinação de Cu, Mn e Se por GFAAS, será estudada a influência do preparo das suspensões dos géis contendo as frações das metaloproteínas no comportamento térmico dos analitos, utilizando-se diferentes modificadores químicos e diferentes programas de aquecimento. Na determinação de Ca, Fe e Zn por FAAS, além do preparo das amostras utilizando a mineralização dos spots protéicos em forno de micro-ondas, será estudada a possibilidade da extração dos analitos das metaloproteínas separadas nas frações dos géis por ultra-som. Nesses estudos, diferentes tempos e potências de agitação ultra-sônica serão avaliados. As determinações serão feitas utilizando-se espectrômetros de absorção atômica SHLVIADZU modelo AA-6800. A proposta de trabalho, além possibilitar a avaliação de metaloproteínas em amostras plasma, tecido hepático e muscular de tilápia do Nilo, poderá também trazer informações importantes para a área de fisiologia e genética de peixes em relação aos estudos do proteoma e metaloma dessa espécie. (AU)

Scientific publications

(10)

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SALEH, MAYRA A. D.; PADILHA, PEDRO M.; HAUPTLI, LUCELIA; BERTO, DIRLEI A.. The ultra-sonication of minerals in swine feed. JOURNAL OF ANIMAL SCIENCE AND BIOTECHNOLOGY, v. 6, AUG 4 2015. (07/59778-0)

FEDERICI PADILHA, CILENE DO CARMO; DE MORAES, PAULA MARTIN; GARCIA, LUCIANA DE ARRUDA; COSTA POZZI, CARLA MARIANE; PEREIRA LIMA, GIUSEPPINA PACE; SERRA VALENTE, JOSE PEDRO; ALVES JORGE, SONIA MARIA; PADILHA, PEDRO DE MAGALHAES. Evaluation of Cu, Mn, and Se in Vegetables Using Ultrasonic Extraction and GFAAS Quantification. FOOD ANALYTICAL METHODS, v. 4, n. 3, p. 319-325, SEP 2011. (07/59778-0)

SALEH, MAYRA A. D.; PADILHA, PEDRO M.; HAUPTLI, LUCELIA; BERTO, DIRLEI A.. The ultra-sonication of minerals in swine feed. JOURNAL OF ANIMAL SCIENCE AND BIOTECHNOLOGY, v. 6, p. 8-pg., 2015-08-04. (07/59778-0)

SILVA, FABIO A.; CAVECCI, BRUNA; BALDASSINI, WELDER A.; LIMA, PAULA M.; MORAES, PAULA M.; ROLDAN, PAULO S.; PADILHA, CILENE C. F.; PADILHA, PEDRO M.. Selenium fractionation from plasma, muscle and liver of Nile tilapia (Oreochromis niloticus). OURNAL OF FOOD MEASUREMENT AND CHARACTERIZATIO, v. 7, n. 4, p. 8-pg., 2013-12-01. (07/59778-0)

SILVA, FABIO A.; PADILHA, CILENE C. F.; DE CASTRO, GUSTAVO ROCHA; ROLDAN, PAULO DOS SANTOS; DE ARAUJO NOGUEIRA, ANA R.; MORAES, PAULA M.; PADILHA, PEDRO M.. Selenium determination in tissue samples of Nile tilapia using ultrasound-assisted extraction. CENTRAL EUROPEAN JOURNAL OF CHEMISTRY, v. 9, n. 1, p. 119-125, FEB 2011. (07/59778-0)

SILVA, FABIO A.; CAVECCI, BRUNA; BALDASSINI, WELDER A.; LIMA, PAULA M.; MORAES, PAULA M.; ROLDAN, PAULO S.; PADILHA, CILENE C. F.; PADILHA, PEDRO M.. Selenium fractionation from plasma, muscle and liver of Nile tilapia (Oreochromis niloticus). JOURNAL OF FOOD MEASUREMENT AND CHARACTERIZATION, v. 7, n. 4, p. 158-165, DEC 2013. (07/59778-0)

SALEH, MAYRA A. D.; BERTO, DIRLEI A.; PADILHA, PEDRO M.. Ultrasound-assisted extraction of Na and K from swine feed and its application in a digestibility assay: A green analytical procedure. ULTRASONICS SONOCHEMISTRY, v. 20, n. 6, p. 1353-1358, NOV 2013. (07/59778-0)

SANTOS, FELIPE A.; LIMA, PAULA M.; NEVES, RENATO C. F.; MORAES, PAULA M.; PEREZ, CARLOS A.; SILVA, MARCELO O. A.; ARRUDA, MARCO A. Z.; CASTRO, GUSTAVO R.; PADILHA, PEDRO DE MAGALHAES. Metallomic study on plasma samples from Nile tilapia using SR-XRF and GFAAS after separation by 2D PAGE: initial results. Microchimica Acta, v. 173, n. 1-2, p. 43-49, APR 2011. (07/59778-0)

NEVES, RENATO C. F.; MORAES, PAULA M.; FERRARI, JEISSON E. M.; LIMA, PAULA M.; SANTOS, FELIPE A.; DE CASTRO, GUSTAVO ROCHA; BARROS, MARGARIDA M.; PADILHA, PEDRO M.. Levels of copper in Nile tilapia from Brazil. FOOD ADDITIVES & CONTAMINANTS PART B-SURVEILLANCE, v. 4, n. 4, p. 238-243, 2011. (07/59778-0)

LIMA, PAULA M.; NEVES, RENATO DE C. F.; DOS SANTOS, FELIPE A.; PEREZ, CARLOS A.; DA SILVA, MARCELO O. A.; ARRUDA, MARCO A. Z.; DE CASTRO, GUSTAVO R.; PADILHA, PEDRO M.. Analytical approach to the metallomic of Nile tilapia (Oreochromis niloticus) liver tissue by SRXRF and FAAS after 2D-PAGE separation: Preliminary results. Talanta, v. 82, n. 3, p. 1052-1056, AUG 15 2010. (07/59778-0)