Formação dos compartimentos cardíacos de influxo e efluxo no embrião de vertebrados e a sinalização pelo ácido retinoico: um estudo de mapa do destino

Resumo

Os objetivos são: 1) Esclarecer se, em embriões precoces, os precursores de câmaras atriais maduras podem ser identificados através da expressão de marcadores genéticos. 2) Definir se a expressão desses marcadores é regulada pela sinalização pelo ácido retinóico (AR). Para resolver essas questões nós utilizaremos cultura de embriões de camundongo e de galinha. Para estabelecer as relações de linhagem entre as células do coração primitivo e do coração maduro nós utilizaremos a técnica de mapa do destino pela injeção do traçador fluorescente Dil. Para relacionar a localização das linhagens precursoras dos átrios com o padrão de expressão de marcadores nós utilizaremos o gene da AMHC1 (atrial myosin heavy chain 1) na galinha e o transgene SMyHC3-HAP em camundongos. Os estudos de mapa do destino/expressão de marcadores serão realizado em 3 estágios de desenvolvimento em embriões de galinha e em 2 estágios em embriões de camundongo. Para estabelecer o controle da expressão de marcadores atriais pelo AR, embriões transgênicos SMyHC3-HAP serão tratados em cultura com AR e BMS 493, um antagonista do AR. Resultados esperados incluem a descrição inédita de um mapa do destino cardíaco em embriões de camundongo, o estabelecimento das reais relações entre expressão de marcadores genéticos e os precursores atriais e o estabelecimento dos modos de regulação do marcador SMyHC3-HAP pelo AR. (AU)