Análise de estruturas vesiculares exportadas e de moléculas secretadas pelos fungos patogênicos Paracoccidioides brasiliensis e Cryptococcus neoformans

Resumo

O objetivo geral deste projeto é utilizar os fungos patogênicos Paracoccidioides brasiliensis e Cryptococcus neoformans como modelo no estudo de estruturas vesiculares membranosas exportadas para o meio extracelular (exossomo-like) e de componentes da parede celular. Pretende-se isolar e caracterizar as vesículas, determinar sua composição em comparação com a composição de frações da parede celular, explorar seu papel imunomodulatório. e o papel da monohexosilceramida no seu mecanismo de secreção. Em C.neoformans pretendemos avaliar o papel dessas vesículas na secreção e crescimento da cápsula polissacarídica. A importância de vesículas exocíticas como um mecanismo de secreção, como transportadoras de moléculas imunomodulatórias, bem como de relevância na relação parasita-hospedeiro, tem sido reconhecida recentemente, porém sua descrição em fungos é restrita a resumos de congressos apresentados pelos grupos de pesquisa com sublinhas neste projeto. Em P. brasiliensis, as análises serão realizadas comparativamente em isolados que provocam um perfil distinto de infecção em camundongos. Serão também motivo de estudo as seguintes moléculas secretadas pelo P. brasiliensis: a chaperone Mdj1 recentemente encontrada na parede celular, as isoformas da gp43 recombinantes de P. pastoris que são motivo de patente e uma serino-tiol proteinase exocelular recombinante a ser obtida nessa levedura. (AU)