Análise funcional e estrutural de proteínas antioxidantes dependentes de tióis: uma investigação de mecanismos moleculares de catálise e da formação de complexos protéicos contendo dissulfetos mistos

Resumo

Tiorredoxinas peroxidases (Tpxs) são capazes de decompor H2O2, peróxidos orgânicos e peroxinitritos, utilizando cisteínas altamente reativas como redutores. A maioria das TPxs utiliza tiorredoxina (Trx) como redutor. NADPH, por sua vez, reduz Trx em reação catalisada por tiorredoxina redutase (Trr). A transferência de elétrons entre essas proteínas ocorre através de pares de cisteínas presentes nos sítios ativos de cada proteína e substituições de uma dessas por serinas levam à formação de complexos unidos por dissulfetos mistos intermoleculares. Trabalhos recentes apontam o envolvimento de TPxs na sinalização celular, seja por meio do estabelecimento de dissulfetos mistos com MAP quinases, seja pela modulação dos níveis celulares de H2O2. Adicionalmente, sob determinadas condições, as TPxs apresentam forte oligomerização que lhes confere a função de chaperona. Este projeto tem por objetivo a análise funcional de TPxs (e relacionadas) e de seus sistemas redutores em Saccharomyces cerevisiae e Xylella fastidiosa, por meio de estudos bioquímicos e determinação da estrutura 3D por meio de cristalografia de raios X de proteínas e complexos. Adicionalmente, serão determinados por espectrometria de massas, novos parceiros proteicos envolvidos na sinalização por H2O2capazes de formar dissulfetos mistos com as TPxs. A caracterização estrutural e funcional dessas proteínas deve resultar em um melhor entendimento de seus mecanismos moleculares de ação e auxiliar na criação de quimioterápicos para o combate a patógenos como, no caso, de X. fastidiosa. (AU)