Desenvolvimento de um ensaio para triagem molecular de alto desempenho (high throughput screening) de inibidores da enzima glicose-6-fosfato desidrogenase de Trypanosoma cruzi

Resumo

O presente projeto de pesquisa visa o estudo biofísico e bioquímico da enzima glicose-6-fosfato desidrogenase de Trypanosoma cruzi (TcG6PDH, EC 1.1.1.49). Considerando que esta enzima é um alvo macromolecular validado para o planejamento de novos fármacos, inibidores desta enzima são candidatos a novos agentes tripanocidas com alto potencial de desenvolvimento clínico. Assim, o presente projeto incorpora a obtenção da proteína de interesse por expressão em sistema heterólogo e caracterização biofísica e bioquímica através das técnicas de espalhamento dinâmico de luz (DLS), Thermofluor® e cinética enzimática. Temos ainda como objetivo o desenvolvimento de uma metodologia de triagem de alto desempenho (HTS) que possa ser usada na identificação e otimização de compostos líderes. Além disso, realizaremos estudos de cristalização da TcG6PDH visando determinar sua estrutura tridimensional. O projeto será desenvolvido junto ao Laboratório Nacional de Biociências (LNBio), que possui completa infraestrutura para a realização de todas as etapas propostas no projeto. (AU)