Estudos funcionais e estruturais das enzimas relacionadas a produção de NADPH em trypanosomatídeos

Resumo

O NADPH serve de cofator para enzimas que atuam em diversos processos essenciais à homeostase celular, tais como: biossínteses de lipídeos, colesterol e produção e neutralização de espécies reativas de oxigênio e nitrogênio. As enzimas glicose-6-fosfato desidrogenase (G6PDH), 6-fosfogluconato desidrogenase (6PGDH), isocitrato desidrogenase (IDH) e enzima málica (ME) estão relacionadas com a manutenção dos níveis celulares de NADPH. As enzimas G6PDH e 6PGDH pertencem ao ramo oxidativo da via de síntese de pentoses (PPP) enquanto as enzimas IDH e ME oxidam intermediários do ciclo do ácido cítrico para reduzir moléculas de NADP+ em NADPH. Ambas as enzimas IDH e ME apresentam isoformas distintas, localizadas na mitocôndria e no citoplasma dos parasitas. A presença destas enzimas no citoplasma representa uma alternativa à produção de NADPH quando as células não dispõem de glicose suficiente para manter um fluxo de metabólitos pela via de síntese de pentoses. As G6PDHs de parasitas e humanos vêm sendo estudadas por nosso grupo há alguns anos com o propósito de desenvolver novos fármacos contra doenças parasitárias negligenciadas. Recentemente, estabelecemos uma colaboração com o grupo liderado pela pesquisadora Dra. Cristina Nowicki (do Inst. de Química e Fisicoquímica-biológica da Univ. de Buenos Aires, Argentina) para explorarmos também as demais enzimas produtoras de NADPH em T. cruzi, mais especificamente a TcME e TcIDH.Os principais objetivos deste projeto são: identificar novos inibidores paras as enzimas TcIDH e TcME, determinação das estruturas cristalográficas da TcIDH e TcME e mapear o sítio de ligação dos novos inibidores nas estruturas cristalográficas das enzimas TcIDH e TcME. (AU)