Descoberta de inibidores não fosforilados da enzima Glicose-6 fosfato isomerase

Resumo

A leishmaniose é uma doença parasitária com mais de um milhão de novos casos anualmente. Apesar de sua gravidade, o tratamento da leishmaniose ainda é um desafio, porque todos os medicamentos disponíveis apresentam limitações importantes, o que demonstra a necessidade de se buscar novas alternativas terapêuticas. A enzima glicose-6 fosfato isomerase (PGI) e considerada um alvo molecular promissor para o desenvolvimento de fármacos antiparasitários, uma vez que atua em duas vias metabólicas, essenciais a diferentes etapas do ciclo de vida do parasita, a via glicolítica e gliconeogênica. Este trabalho tem como objetivo identificar novos inibidores, não fosforilados, da PGI de Leishmania mexicana (LmPGI) com potencial para o desenvolvimento de fármacos anti-parasitários. Para isso, um ensaio enzimático de alto desempenho (HTS), com leitura de fluorescência, foi desenvolvido, a partir do acoplamento da atividade da LmPGI com as enzimas G6PDH de Leuconostoc mesenteroides e Diaphorase de Clostridium kluyveri. Este ensaio foi utilizado para triar uma biblioteca de 43000 compostos, disponibilizadas comercialmente pela TIMTEC e Chembridge. O factor de Z das placas testadas, no ensaio HTS, variou entre 0,70 e 0,92, o que indica a robustez do ensaio. Os inibidores confirmados contra LmPGI foram testados contra a enzima homólogo de Trypanosoma cruzi (TcPGI). O próximo passo deste projeto é determinar a eficácia in vitro dos inibidores identificados contra cultura de células de Leishmania ssp e T. cruzi.