Caracterização estrutural da enzima málica de Trypanosoma cruzi e descoberta de inibidores por ensaio de triagem de alto desempenho.

Resumo

A tripanossomíase americana, ou Mal de Chagas, é uma enfermidade associada à infecção pelo protozoário da espécie Trypanosoma cruzi. Esta doença possui tratamento com drogas de alta toxicidade e somente para a fase aguda. A pesquisa de novos alvos metabólicos pode levar ao desenvolvimento de novos fármacos para o tratamento da fase crônica da doença. As enzimas que produzem NADPH são consideradas alvos moleculares promissores, pois a redução dos níveis de NADPH no parasita afeta tanto sua capacidade de propagação, quanto de defesa ao ataque oxidativo desencadeado pelo sistema imune de seu hospedeiro mamífero. Assim, desidrogenases que reduzem NADP+ se mostram como interessantes alvos terapêuticos, sendo as enzimas do ciclo de pentose fosfato, como a glucose-6-fosfato desidrogenase (G6PD), as principais produtoras quando o parasita utiliza a glicose como fonte de carbono, o que ocorre quando este se encontra na corrente sanguínea do hospedeiro mamífero. Porém, em ambiente intracelular, o parasita altera seu metabolismo para o uso de aminoácidos, ganhando importância outras enzimas, tais como a enzima málica e a isocitrato desidrogenase. Este projeto visa caracterizar estruturalmente a enzima málica de T. cruzi e identificar novos inibidores que possam ser usados como sondas químicas (chemical probes) para estudar o efeito da inibição deste alvo no parasita. Além disso, daremos continuação ao projeto de mestrado, que resultou em um sistema de expressão e cristalização da G6PD, que será usada para estudos estruturais de novos inibidores identificados pelo grupo.