Estudo de mecanismos envolvidos na modulação da resposta de Linfócitos T contra antígenos tumorais por células dendríticas derivadas de monócitos de pacientes com câncer

Resumo

As células dendríticas (DCs) são as mais eficientes células apresentadoras de antígenos (APCs) para iniciar, coordenar e regular a resposta imune adaptativa, através da ativação de linfócitos T naive. Entretanto as DCs apresentam grande heterogeneidade e flexibilidade funcional, participando não somente da indução de respostas imunes, como também da manutenção fisiológica da tolerância periférica, inclusive a auto-antígenos. Por outro lado, a possibilidade da geração de DCs in vitro permitiu que se desenvolvessem protocolos de imunoterapia, principalmente em pacientes com câncer. No entanto, a utilização de DCs derivadas de monócitos de pacientes com câncer parece não ser a ferramenta ideal para a utilização em ensaios clínicos de imunoterapia. A presença ou desenvolvimento de tumores parece atuar ativamente no desequilíbrio fisiológico do sistema imune, interferindo na capacidade dos monócitos desses indivíduos, e DCs deles derivadas, de estimular a resposta imune aos antígenos por elas apresentados. Em nossos resultados anteriores, DCs provenientes de monócitos de pacientes com câncer de mama apresentaram alterações significativas na expressão de moléculas co-estimuladoras e promoveram uma geração/expansão significativamente maior de células T com fenótipo e função reguladora in vitro quando comparadas às células de indivíduos saudáveis, provocando também uma ativação linfocitária deficiente e produção elevada de TGF-². Todavia, os mecanismos responsáveis por estas alterações funcionais das DCs derivadas de células das pacientes ainda não são conhecidos. Assim, a elucidação dos mecanismos responsáveis pelas alterações das DCs e por seu viés para indução de linfócitos reguladores torna-se um objetivo relevante, que, atingido, poderá permitir a correção funcional destas células e sua melhor exploração em protocolos imunoterapêuticos. Portanto, o presente projeto visa investigar possíveis mecanismos capazes de desviar a função de monócitos, células dendríticas imaturas e maduras derivadas de pacientes com câncer, para a indução de supressão da resposta de linfócitos T in vitro (em ensaios antígeno-específicos e não-específicos). Especificamente, pretende-se: - Avaliar o potencial estimulador de APCs provenientes de pacientes com câncer na indução de subpopulações de linfócitos T CD4+ (Th1, Th2, Th17 e Treg);- Investigar os mecanismos contato-independentes na indução de subpopulações de linfócitos T CD4+ através da correlação entre a produção/bloqueio de citocinas (ex. IL-10 e TGF-beta) pelas APCs e as subpopulações linfocitárias estimuladas;- Investigar os mecanismos contato-dependentes na indução de subpopulações de linfócitos T CD4+ através da correlação entre a expressão/bloqueio de moléculas de superfície (CD80, CD86, PD-L1 e PD-L2) nas APCs e as subpopulações linfocitárias estimuladas;- Avaliar a capacidade de APCs de pacientes com câncer na indução de respostas de linfócitos T contra antígenos (tumorais ou não relacionados.);