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Biochemical and Cellular Characterization of the Kidney-type Glutaminase in complex with its partners

Grant number: 10/13992-3
Support Opportunities:Scholarships in Brazil - Master
Start date: March 01, 2011
End date: February 28, 2013
Field of knowledge:Biological Sciences - Biochemistry - Chemistry of Macromolecules
Principal Investigator:Sandra Martha Gomes Dias
Grantee:Emerson Rodrigo Machi Gomes
Host Institution:Centro Nacional de Pesquisa em Energia e Materiais (CNPEM). Campinas , SP, Brazil
Associated research grant:09/10875-9 - Cellular and biochemical studies of the glutaminase enzyme and its relation with cancer, AP.JP

Abstract

Células tumorais apresentam uma autonomia metabólica aumentada em comparação a células não-transformadas, incorporando nutrientes e metabolizando-os através de vias que suportam o seu crescimento e proliferação. Os trabalhos clássicos em metabolismo de células tumorais se focam na questão da bioenegética, particularmente no aumento da glicólise e supressão da fosforilação oxidativa (o efeito Wargurb). Entretanto, as atividades biossíntéticas requeridas para a geração de células filhas são igualmente importantes para o crescimento do tumor e somente nos últimos anos que estas vias tem sido trazidas à tona. Este projeto enfatiza o estudo da enzima glutaminase, a qual processa glutamina em glutamato para posterior produção de alfa-cetoglutarato pela enzima glutamato desidrogenase, reabastecendo o ciclo do TCA e suportando seu funcionamento e geração de metabólitos essenciais para a síntese de macromoléculas. Dois genes, GLS1 e GLS2, codificam para as isoenzimas glutaminase kidney-type (KGA) e glutaminase liver-type (LGA), respectivamente, além de variantes por splicing alternativo. Estas proteínas apresentam outros domínios além do catalítico, assim como repetições do tipo ankirin, sabidamente envolvidas em contatos proteínas-proteínas. Na busca por parceiros de interação da KGA através de ensaios de pull-down e caracterização, por espectometria de massas, de bandas diferenciais em gel de SDS-PAGE, identificamos a enzima aldolase A como provável candidato. A aldolase A é uma enzima da via glicolítica que converte frutose 1-6-bifosfato em dihidroxiacetona fosfato e gliceraldeído 3-fostato. Além de sua função enzimática, vários papéis não catalíticos já foram descritos, alguns deles envolvidos na formação de actina e de vesículas endocíticas, via interação com diferentes proteínas. Estas múltiplas interações coloca a enzima aldolase A como uma importante scaffold, chave para diferentes processos celulares. Os objetivos deste projeto serão de estudar o impacto da interação da aldolase A com a KGA sobre a atividade da glutaminase e sua localização celular.

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Scientific publications
(References retrieved automatically from Web of Science and SciELO through information on FAPESP grants and their corresponding numbers as mentioned in the publications by the authors)
DE GUZZI CASSAGO, CAROLINA APARECIDA; DIAS, MARILIA MEIRA; PINHEIRO, MATHEUS PINTO; PASQUALI, CAMILA CRISTINA; SILVA BASTOS, ALLINY CRISTINY; ISLAM, ZEYAUL; CONSONNI, SILVIO ROBERTO; DE OLIVEIRA, JULIANA FERREIRA; GOMES, EMERSON MACHI; RODRIGUES ASCENCAO, CAROLLINE FERNANDA; et al. Glutaminase Affects the Transcriptional Activity of Peroxisome Proliferator-Activated Receptor gamma (PPAR gamma) via Direct Interaction. BIOCHEMISTRY, v. 57, n. 44, p. 6293-6307, . (14/20673-2, 11/10127-2, 17/11766-5, 16/22246-0, 15/25832-4, 10/13992-3, 14/19518-2, 11/13981-4)
Academic Publications
(References retrieved automatically from State of São Paulo Research Institutions)
GOMES, Emerson Rodrigo Machi. Biochemical and cellular characterization of Kidney-type glutaminase with their interaction partners. 2013. Master's Dissertation - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Ciências Médicas Campinas, SP.