EMU concedido no âmbito do projeto aprovado 2013/50228-8, nome do equipamento: uPLC-HRMS (cromatógrafo líquido de ultra resolução acoplado com espectrômetro de massas de alta resolução)

Resumo

O cromatógrafo UPLC-MS/MS com acessórios (inclui, dentre outros itens, sistema de detecção por MS tandem QTof, bomba de vácuo, fonte LockSpray com fonte de eletrospray, monitor digital LeNovo, cromatógrafo de ultra-desempenho Acquity, detector de arranjo de diodos, software MassLynx, gerador de nitrogênio, amostras de colunas cromatográficas) deverá ser utilizado com os seguintes propósitos: a) análise da presença de peptídios anti-microbianos em amostras do coral Mussismilia spp. bem como em linhagens microbianas isoladas a partir do mesmo coral, peptídios estes que deverão ser inequivocamente identificados pela análise de fragmentação de alta resolução MS/MS; b) análise da presença de briostatinas e outros policetídeos complexos presentes em amostras de Bugula spp., bem como em micro-organismos que eventualmente possam vir a ser isolados e cultivados a partir dos briozoários. Estes policetídios também deverão ser inequivocamente identificados pela análise de fragmentação de alta resolução MS/MS; c) análise da presença de tetrodotoxinas e derivados em amostras de Tetraodon spp. (baiacús) e micro-organismos associados que serão isolados e identificados a partir destes peixes. As toxinas deverão ser igualmente identificadas pela análise de fragmentação de alta resolução MS/MS; d) em experimentos de desreplicação para identificação inequívoca de substâncias conhecidas presentes em extratos de micro-organismos e de invertebrados marinhos, buscando-se identificar aquelas conhecidas de maneira a que se possa priorizar ao máximo o isolamento de substâncias bioativas inéditas; e) identificação de peptídeos de Cnidaria, a serem isolados pela equipe do Prof. André Tempone (Instituto Adolfo Lutz, SP). As principais vantagens do USO de UPLC-UV-MS/MS são: ultra desempenho de separação cromatográfica, permitindo analisar com extrema acurácia a massa e espectro UV de substâncias minoritárias (frequentemente as de maior interesse), utilização de sondas diferenciadas para ionização de material bruto (menos limpo) e material melhor preparado (amostras já semi-purificadas), investigar em detalhe a fragmentação tandem (MS/MS) de maneira a se identificar inequivocamente substâncias presentes nas amostras analisadas, construção de um banco de dados para a realização de análises de perfil químico, de desreplicação, bem como de identificação de substâncias pertencentes a classes específicas (briostatinas, tetrodotoxinas, polipeptídeos), análise de medidas de massa exata para se estabelecer a composição atômica de substâncias desconhecidas, possibilidade de utilizar diferentes fontes de ionização (ESI, APCI, ESCI, APPI, nanoFlow ESI) em um mesmo aparelho para a realização de análises para diferentes propósitos objetivando a detecção de substâncias de diferentes classes metabólicas. (AU)