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A real-time reverse transcriptase polymerase chain reaction for detection and quantification of Vesiculovirus

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Author(s):
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Aline Lavado Tolardo [1] ; William Marciel de Souza [2] ; Marilia Farignoli Romeiro [3] ; Luiz Carlos Vieira [4] ; Luciano Kleber de Souza Luna [5] ; Dyana Alves Henriques [6] ; Jansen de Araujo [7] ; Carlos Eduardo Hassegawa Siqueira [8] ; Tatiana Elias Colombo [9] ; Victor Hugo Aquino [10] ; Benedito Antonio Lopes da Fonseca [11] ; Roberta Vieira de Morais Bronzoni [12] ; Maurício Lacerda Nogueira [13] ; Edison Luiz Durigon [14] ; Luiz Tadeu Moraes Figueiredo [15]
Total Authors: 15
Affiliation:
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[1] Universidade de São Paulo. Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto. Centro de Pesquisa em Virologia - Brasil
[2] Universidade de São Paulo. Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto. Centro de Pesquisa em Virologia - Brasil
[3] Universidade de São Paulo. Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto. Centro de Pesquisa em Virologia - Brasil
[4] Universidade de São Paulo. Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto. Centro de Pesquisa em Virologia - Brasil
[5] Universidade de São Paulo. Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto. Centro de Pesquisa em Virologia - Brasil
[6] Universidade de São Paulo. Instituto de Ciências Biomédicas. Laboratório de Virologia Clínica e Molecular - Brasil
[7] Universidade de São Paulo. Instituto de Ciências Biomédicas. Laboratório de Virologia Clínica e Molecular - Brasil
[8] Universidade Federal de Mato Grosso. Instituto de Ciências da Saúde. Centro Universitário de Sinop - Brasil
[9] Faculdade de Medicina de São José do Rio Preto. Laboratório de Pesquisa em Virologia - Brasil
[10] Universidade de São Paulo. Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto. Departamento de Análises Clínicas, Toxicológicas e Bromatológicas - Brasil
[11] Universidade de São Paulo. Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto. Centro de Pesquisa em Virologia - Brasil
[12] Universidade Federal de Mato Grosso. Instituto de Ciências da Saúde. Centro Universitário de Sinop - Brasil
[13] Faculdade de Medicina de São José do Rio Preto. Laboratório de Pesquisa em Virologia - Brasil
[14] Universidade de São Paulo. Instituto de Ciências Biomédicas. Laboratório de Virologia Clínica e Molecular - Brasil
[15] Universidade de São Paulo. Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto. Centro de Pesquisa em Virologia - Brasil
Total Affiliations: 15
Document type: Journal article
Source: Memórias do Instituto Oswaldo Cruz; v. 111, n. 6, p. 385-390, 2016-06-03.
Abstract

Vesiculoviruses (VSV) are zoonotic viruses that cause vesicular stomatitis disease in cattle, horses and pigs, as well as sporadic human cases of acute febrile illness. Therefore, diagnosis of VSV infections by reliable laboratory techniques is important to allow a proper case management and implementation of strategies for the containment of virus spread. We show here a sensitive and reproducible real-time reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) for detection and quantification of VSV. The assay was evaluated with arthropods and serum samples obtained from horses, cattle and patients with acute febrile disease. The real-time RT-PCR amplified the Piry, Carajas, Alagoas and Indiana Vesiculovirus at a melting temperature 81.02 ± 0.8ºC, and the sensitivity of assay was estimated in 10 RNA copies/mL to the Piry Vesiculovirus. The viral genome has been detected in samples of horses and cattle, but not detected in human sera or arthropods. Thus, this assay allows a preliminary differential diagnosis of VSV infections. (AU)

FAPESP's process: 13/02256-2 - Development of Real Time RT-PCR for diagnosis of infections by Piry virus and other vesiculovirus
Grantee:Aline Lavado Tolardo
Support Opportunities: Scholarships in Brazil - Master
FAPESP's process: 13/14929-1 - Detection of arbovirus and other RNA viruses by real time RT-PCR and study of the viroma
Grantee:Luiz Tadeu Moraes Figueiredo
Support Opportunities: Regular Research Grants
FAPESP's process: 12/24150-9 - Research of virus in wild rodents, mosquitoes and ticks
Grantee:William Marciel de Souza
Support Opportunities: Scholarships in Brazil - Doctorate
FAPESP's process: 12/02836-6 - Development of Real Time RT-PCR Techniques for arbovirus that cause human disease and nucleotide sequencing identification of them
Grantee:Marilia Farignoli Romeiro
Support Opportunities: Scholarships in Brazil - Master