Elucidacao dos mecanismos moleculares que mediam a resposta da celulas de melanoma para a atividade combinada das vias de p53/arf e ifnb.

Resumo

Relatos da literatura e os resultados do Setor de Vetores Virais (SW, InCor, FMUSP) têm mostrado que a morte celular pode ser induzida pela combinação de atividades das vias de p53/ARF e interferon tipo-I Especificamente, o SVV mostrou que o tratamento combinado, mas não individual, com vetores virais codificando p19Arf e interferon-ß (IFNß) induziu morte em células B16, melanoma de camundongo. Poucos dados existem para explicar exatamente como estes fatores distintos podem cooperar. Sabendo que ambas as vias de p53/ARF e IFNß têm impacto em expressão gênica, o SW propõe a implementação de novos estudos que têm como alvo a identificação de genes críticos que são ativados pelo tratamento combinado e que agem como mediadores da resposta celular para a estratégia de transferência gênica. A importância funcional dos fatores identificados será avaliada in vitro utilizando knockdawn e/ou super-expressão do fator seguido por análise do ciclo celular, proliferação, atividade de p53 e morte de células BI6. Em contraste a estes experimentos exploratórios, a localização subcelular, modificação pós-traducional e interação de proteínas que são conhecidas como críticas para p53/ARF (p53, mdm2, ASPP) ou IFNß (IFNα, IRF3, IRF7, Stat1 e Stat2) serão avaliadas após tratamento viral. O estabelecimento de um modelo humano para o estudo das interações de p53/ARF-IFN também está sendo proposto aqui. A elucidação dos mecanismos moleculares que mediam a resposta de células de melanoma para a atividade combinada das vias de p53/ARF e IFNß contribuirá para nosso conhecimento da biologia tumoral e, possivelmente, revelará oportunidades para intervenção terapêutica. (AU)