Caracterização de checkpoint intra-S em células de Trypanosoma

Resumo

O ciclo celular é um processo altamente controlado, para garantir que cada célula filha receba o mesmo material genético da célula-mãe. Assim, na presença de uma perturbação do ciclo celular, a progressão deste pode ser atrasada ou interrompida. A via bioquímica que leva a esta parada/interrupção do ciclo celular é denominada checkpoint. Neste sentido, o termo checkpoint refere-se a transições de fases que estão sendo interrompidas. Por esta razão, são definidos G1/S checkpoint, intra-S checkpoint e G2/M checkpoint. Este projeto pretende investigar a presença de checkpoint intra-S em Trypanosoma na presença de quebras de simples fita ou duplas fita de DNA. Mais que isto, pretende avaliar se este checkpoint atua (i) bloqueando a elongação das forquilhas de replicação e /ou (ii) bloqueando o disparo de novas origens de replicação. Uma vez confirmada esta resposta celular de bloquear a continuação da replicação frente ao dano de DNA, pretendemos avaliar o papel das kinases ATM e ATR neste processo. Este projeto será realizado em T. brucei e T. cruzi. Como estes eucariontes divergiram muito cedo na linhagem evolutiva, este projeto ambiciona caracterizar o checkpoint intra-S nestes parasitas e eventualmente definir novas estratégias para célula lidar com danos de DNA. Alem disso, o T. brucei, mas não o T. cruzi, conta com uma quebra de dupla fita de DNA, gerada durante a replicação, para causar o processo de recombinação que leva a variação antigênica fundamental para o sucesso da infecção deste parasita. Assim, avaliar como o parasita lida com danos de DNA durante a fase S do ciclo celular deve contribuir de maneira significativa para o conhecimento do sucesso da infecção do hospedeiro mamífero pelo T. brucei. (AU)