Envolvimento da autofagia nas alterações metabólicas e inflamatórias do tecido adiposo associadas à Obesidade induzida por dieta hiperlipídica

Resumo

Em continuação aos experimentos realizados durante mestrado (FAPESP#2016/05406-3), no presente projeto de doutorado direto, testaremos a hipótese de que a via da autofagia é uma importante mediadora das alterações metabólicas, morfológicas e inflamatórias do tecido adiposo decorrentes da obesidade. Durante o mestrado, nós realizamos protocolo experimental onde camundongos C57BL6/J selvagens alimentados com dieta controle ou hiperlipídica foram tratados ou não com o inibidor farmacológico da autofagia cloroquina (CQ) por 8 semanas. Resumidamente, encontramos que camundongos tratados com cloroquina estão parcialmente protegidos da Obesidade (ganho de peso e adiposidade) e intolerância à glicose induzidas pela ingestão de dieta hiperlipídica. Para o doutorado direto, propomos investigar uma possível participação da termogênese independente do tremor muscular na redução de ganho de peso e adiposidade induzida pela cloroquina. Para isto, camundongos selvagens (WT) ou deficientes para UCP1 alimentados com dieta hiperlipídica serão tratados ou não com cloroquina e avaliados para o ganho de peso, ingestão alimentar, gasto energético, adiposidade, diâmetro e número de adipócitos, tolerâncias à insulina e à glicose, captação e metabolismo da glicose e de ácidos graxos, conteúdo e função mitocondrial, sinalização intracelular da insulina e inflamatória, o recrutamento e fenótipo de leucócitos e inflamação do tecido adiposo branco e fígado. Investigaremos também durante o doutorado, o efeito da inibição genética da autofagia especificamente em adipócitos nas alterações metabólicas, morfológicas e inflamatórias do tecido adiposo decorrentes da Obesidade. Para isto, camundongos selvagens (ULK1 floxeado AdipoCre negativos) ou com deleção específica em adipócitos da ULK1, uma quinase que participa na biogênese dos autofagossomos (ULK1 floxeado AdipoCre positivos), serão induzidos à Obesidade por HFD e avaliados para os parâmetros listados acima. Testes estatísticos apropriados serão empregados para análise dos resultados (GraphPad Prism 6.0). Dados serão expressos como média ± SEM, nível de significância p<0,05. (AU)