Aspectos genéticos e epigenéticos na carcinogênese gástrica

Resumo

O câncer gástrico é o quarto tipo de câncer mais comum e a segunda maior causa de morte por câncer no mundo. Atualmente, o Brasil situa-se em quarto lugar quanto à maior prevalência na América Latina. Alterações nos padrões de metilação ou no remodelamento da cromatina têm sido observadas em processos carcinogênicos por regularem a expressão gênica. Além disso, alterações citogenéticas têm sido observadas em vários tipos tumorais, incluindo o câncer gástrico. A investigação desses mecanismos genéticos e epigenéticos poderá auxiliar na determinação mais precisa do diagnóstico, do prognóstico e no estabelecimento de uma conduta terapêutica. No presente estudo, inicialmente serão selecionados genes/proteínas diferencialmente expressos por microarray e por ferramentas de proteômica, em duas linhagens celulares gástricas após tratamento com agentes desmetilante e desacetilante para a identificação de genes controlados por metilação de DNA e/ou metilação e acetilação de histonas. Esses genes terão sua expressão avaliada em 50 amostras de tecido gástrico normal e 50 de tumoral por qRT-PCR. Serão clonadas e sequenciadas as regiões promotoras dos genes selecionados por microarray. Genes com expressão diferencial serão avaliados quanto ao padrão de metilação nos promotores gênicos por MS-HRM e/ou padrão de metilação e acetilação de histona H3K9 por ChIP. Também serão avaliados os padrões de metilação e de acetilação de histonas associadas a genes relacionados ao câncer e previamente estudados em nosso laboratório. Paralelamente, será avaliada a expressão de genes envolvidos nas maquinarias de metilação de DNA e de histonas e da acetilação de histonas. A expressão gênica e as modificações epigenéticas serão associadas a sexo, idade, localização, presença de H. pylori, e extensão do tumor, tipo histopatológico e presença de metástase em linfonodo e à distância. Outra abordagem importante utilizada no projeto será a análise de CGH nas linhagens para identificação de alterações citogenéticas. O projeto irá gerar novas e incrementais informações biológicas, como biomarcadores, que possibilitarão melhor compreensão etio e fisiopatológica dessa neoplasia, com potencial aplicação na prática médica. (AU)