Como as proteínas de checkpoint Rad9 e Hus1 atuam na manutenção da estabilidade do genoma do protozoário Leishmania major?

Resumo

Nosso laboratório vem contribuindo para o entendimento das vias de sinalização de danos no DNA no protozoário parasita Leishmania. O estudo dos eventos de detecção e sinalização de danos no DNA de um organismo que muito cedo divergiu na linhagem eucariótica pode ajudar da compreensão de como as Resposta a Danos no DNA (DDR) se estabeleceu nos eucariotos. A partir da identificação e caracterização das proteínas de checkpoint Rad9 e Hus1, que já reportamos, pretendemos investigar o envolvimento destas proteínas em aspectos mais específicos da biologia peculiar destes organismos. Assim, o objetivo geral desta proposta é (i) utilizar linhagens deficientes ou nulas para Rad9 ou Hus1 para caracterizar o papel destas proteínas no controle do número de cópias no genoma de L. major; (ii) utilizar ChIP e ChIP-seq para investigar os complexos que contêm Hus1 ou Rad9 e os loci aos quais Hus1 se associa em L. major em resposta ao estresse replicativo; e (iii) utilizar versões truncadas de Rad9 de L. major para caracterizar o papel de seu domínio C-terminal. (AU)