Protease ADAMTS-1 influenciando o comportamento e o microambiente do câncer de mama

Resumo

Tenho estudado o papel da matriz extra celular e de proteases em biologia tumoral (Franca et al. 2001; Freitas & Jaeger 2002; Freitas et al. 2004; Pinheiro et al. 2004; Freitas et al. 2007; Morais Freitas et al. 2007; Freitas et al. 2008; Gama-de-Souza et al. 2008; Jaeger et al. 2008; Nascimento et al. 2010). Dados obtidos durante meu Pós-Doutorado mostraram que a diminuição de ADAMTS-1, através de nocaute funcional com RNAi, aumenta a migração e invasão em células tumorais de mama com alto grau de malignidade (MDA-MB-231). No projeto proposto, será dada continuidade aos resultados obtidos durante meu Pós-Doutorado, com a ampliação dos questionamentos sobre a molécula de ADAMTS-1. Tentaremos compreender o papel dessa molécula no comportamento de tumores de mama humanos, estabelecendo relação entre a presença de ADAMTS-1, o tipo histológico do tumor e sua graduação histológica. Adicionalmente, a expressão de ADAMTS-1 será correlacionada a curvas de sobrevida de pacientes. Além do estudo in vivo, utilizaremos sistemas in vitro para estudar mecanismos moleculares regulatórios de ADAMTS-1. O modelo in vitro utilizando linhagens celulares com diferentes graus de malignidade irá responder se os níveis de ADAMTS-1 (mRNA e proteína) são alterados na presença de fatores de crescimento e hormônios importantes em neoplasias de mama. Esse modelo também responderá se ADAMTS-1 influencia os receptores desses fatores de crescimento e hormônios, bem como se existe alteração na sinalização envolvendo esses receptores. Finalizando, investigaremos se essa protease modula o micro-ambiente tumoral. Para tanto, analisaremos o efeito de ADAMTS-1 nas seguintes situações experimentais: 1) co-culturas celulares, 2) presença dessa molécula na matriz extracelular extraída de tumores mamários, e 3) células neoplásicas com ADAMTS-1 silenciada serão submetidas a xeno-enxertos em animais atímicos. (AU)