Função anti-inflamatória da apolipoproteína A-IV no diabete melito e seu reflexo sobre o transporte reverso de colesterol de macrófagos: influência da modificação por glicação avançada

Resumo

A relação inversa entre HDL-colesterol e doença cardiovascular é bem estabelecida por estudos epidemiológicos. Por outro lado, ensaios clínicos e estudos genéticos recentes têm falhado em demonstrar benefícios cardiovasculares advindos do aumento da concentração plasmática de HDL-colesterol. Isto pode estar relacionado com a grande heterogeneidade da partícula de HDL em relação a tamanho, composição e pela perda parcial de sua função. Recentemente, a análise do proteoma da HDL evidenciou um perfil diferente na doença cardiovascular, em especial, pela redução da apoA-IV. Assim como a apoA-I, a apoA-IV apresenta propriedades anti-inflamatórias e exerce papel antiaterogênico por diferentes mecanismos. No diabete melito, a modificação da apoA-I por produtos de glicação avançada (AGE) modifica suas propriedades biológicas e reduz sua capacidade de inibir a inflamação, oxidação e de estimular o efluxo de colesterol. Recentemente, nosso grupo demonstrou que a glicação avançada sensibiliza macrófagos à inflamação induzida por calgranulinas e lipopolissacarídeo (LPS) o que prejudica o efluxo de colesterol de macrófagos, pela redução na expressão do receptor de HDL, ABCA-1. Além disso, na presença de AGE, a HDL não é capaz de prevenir a secreção de mediadores inflamatórios por macrófagos. Nossa proposta é analisar a propriedade anti-inflamatória da apoA-IV no diabete melito, especialmente a influência da glicação avançada e como isso pode impactar o transporte reverso de colesterol de macrófagos. Para isso, apoA-IV será isolada do plasma de pacientes diabéticos com controle glicêmico adequado e inadequado e de indivíduos controles saudáveis. Além disso, apoA-IV recombinante será produzida pela E coli e submetida a glicação in vitro. Macrófagos do peritônio de camundongos e células endoteliais da coronária humana (HCAECs) serão tratadas com diferentes os tipos de apoA-IV e, posteriormente, expostas ao LPS. O meio condicionado será coletado para medir a produção de citocinas inflamatórias e moléculas de adesão e para tratar macrófagos não estimulados, previamente enriquecidos com colesterol e 14C-colesterol, para avaliar o efluxo de colesterol mediado por apoA-I. Nas células, serão determinados: mRNA de mediadores inflamatórios e do NF-kB e a expressão dos receptores de HDL (ABCA1 e ABCG1). Os resultados irão ajudar a elucidar o papel antiaterogênico da apoA-IV, como essa função pode ser prejudicada pela glicação avançada presente no diabete melito e como pode ser melhorada pelo controle glicêmico adequado. (AU)