Inibidores e proteases de ectoparasitas: relação de estrutura-função e identificação do papel dessas moléculas na interação de vetores de doenças e seus agentes etiológicos

• Processo: 12/03657-8
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Temático
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2012
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2018
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Química de Macromoléculas
• Pesquisador responsável: Aparecida Sadae Tanaka
• Beneficiário: Aparecida Sadae Tanaka
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Andréa Cristina Fogaça ; Anita Mitico Tanaka-Azevedo ; Francisco Jose Alves Lemos ; Itabajara da Silva Vaz Junior ; Marcos Horacio Pereira ; Margareth de Lara Capurro-Guimarães ; Mariana da Silva Araujo ; Ricardo Nascimento Araujo ; Sergio Schenkman ; Sirlei Daffre
• Auxílio(s) vinculado(s): 17/50409-3 - Searching for proteases and their inhibitors in ticks to be used in vaccine development, AP.R SPRINT
• Bolsa(s) vinculada(s): 17/18370-0 - Estudos funcionais de inibidores de proteases utilizando cultivos celulares de carrapato e mosquito., BP.PD; 16/09874-1 - Estudos funcionais de inibidores de proteases utilizando cultivos celulares de carrapato e mosquito, BP.PD; 16/03736-6 - Clonagem, expressão e purificação de uma proteína quimérica construída com base em proteínas de Rhipicephalus microplus, BP.IC; + mais bolsas vinculadas 15/09268-1 - Caracterização de duas proteases do parasita Babesia bovis: importância na infecção de seus hospedeiros., BP.DR; 14/22464-1 - Clonagem, expressão e purificação de uma aspartil protease (Rm27441) presente em intestino de carrapato Rhipicephalus microplus, BP.IC; 12/20597-9 - Interação de proteases de Babesia bovis, um dos agentes da tristeza parasitária bovina, com inibidores de carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus, e o seu potencial vacinal., BP.PD; 13/01175-9 - Estudo funcional do inibidor de protease BmSEI presente no intestino do carrapato Rhipicephalus microplus e sua participação na infecção por Anaplasma marginale., BP.DR; 12/15191-3 - Caracterização funcional de inibidores de serinoproteases presentes no mosquito Aedes aegypti infectados e não infectados com o vírus da dengue, BP.PD - menos bolsas vinculadas
• Assunto(s): Inibidores de proteases Enzimas proteolíticas Vetores de doenças Ectoparasitoses
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: anti-hemostaticos | enzimas proteolíticas | hematófagos | inibidores de proteases | Interação vetor-parasita | vetor de doenças | Bioquímica

Resumo

O conhecimento da diversidade de moléculas produzidas por vetores de doenças em resposta aos seus agentes etiológicos é uma estratégia importante para identificar alvos importantes na fisiologia destes animais, que poderão ser utilizados no desenho racional de fármacos e pesticidas. A fim de contribuir nesta área de investigação, o presente projeto tem como objetivo geral entender o papel fisiológico dos inibidores de proteases, enzimas proteolíticas e proteínas hipotéticas identificadas em projetos anteriores (utilizando os seguintes modelos de estudo: Triatoma infestans, um dos principais vetores da Doença de Chagas na América Latina, o mosquito Aedes aegypti, vetor da dengue e o carrapato da espécie Rhipicephalus (Boophilus) microplus, ectoparasita de bovinos) na interação de cada um destes vetores com os seus agentes etiológicos (Trypanosoma cruzi, vírus da dengue e Anaplasma marginale). A experiência do grupo em pesquisa relacionada à estrutura e função de inibidores de proteases e anticoagulantes dos três vetores utilizados neste estudo facilitará a execução do projeto proposto. Para garantir o sucesso deste projeto, os experimentos de infecção dos vetores com os respectivos agentes etiológicos serão realizados em colaboração com pesquisadores que já apresentam experiência comprovada com os modelos de infecção a serem utilizados. Além disto, para obter os resultados esperados, o grupo utilizará as seguintes ferramentas: produção de proteínas recombinantes e anticorpos para estas proteínas, RNA de interferência, transcriptoma, microscopia de fluorescência, análise proteômica, experimentos cinéticos clássicos, experimentos de binding em sistema de plasma ressonância, imunização de bovinos, experimentos larvicidas para Aedes e cultura de células de carrapato e mosquito. O conhecimento gerado neste estudo contribuirá no entendimento do papel de inibidores de proteases, proteases e outras moléculas na interação vetor - agente etiológico, e também contribuirá na formação de recursos humanos, e identificação de moléculas com potencial biotecnológico para os problemas relacionados à pecuária e à saúde pública. (AU)

Publicações científicas

(21)

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

MANZATO, VERONICA MORAES; SOARES TORQUATO, RICARDO JOSE; ALVES LEMOS, FRANCISCO JOSE; NISHIDUKA, ERIKA; TASHIMA, ALEXANDRE KEIJI; TANAKA, APARECIDA SADAE. versatile inhibitor of digestive enzymes in Aedes aegypti larvae selected from a pacifastin (TiPI) phage display librar. Biochemical and Biophysical Research Communications, v. 590, p. 139-144, JAN 29 2022. (12/03657-8, 19/03779-5)

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