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Inibidores e proteases de ectoparasitas: relação de estrutura-função e identificação do papel dessas moléculas na interação de vetores de doenças e seus agentes etiológicos

Processo: 12/03657-8
Modalidade de apoio:Auxílio à Pesquisa - Temático
Vigência: 01 de outubro de 2012 - 30 de setembro de 2018
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Química de Macromoléculas
Pesquisador responsável:Aparecida Sadae Tanaka
Beneficiário:Aparecida Sadae Tanaka
Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
Pesquisadores associados:Andréa Cristina Fogaça ; Anita Mitico Tanaka-Azevedo ; Francisco Jose Alves Lemos ; Itabajara da Silva Vaz Junior ; Marcos Horacio Pereira ; Margareth de Lara Capurro-Guimarães ; Mariana da Silva Araujo ; Ricardo Nascimento Araujo ; Sergio Schenkman ; Sirlei Daffre
Auxílios(s) vinculado(s):17/50409-3 - Searching for proteases and their inhibitors in ticks to be used in vaccine development, AP.R SPRINT
Bolsa(s) vinculada(s):17/18370-0 - Estudos funcionais de inibidores de proteases utilizando cultivos celulares de carrapato e mosquito., BP.PD
16/09874-1 - Estudos funcionais de inibidores de proteases utilizando cultivos celulares de carrapato e mosquito, BP.PD
16/03736-6 - Clonagem, expressão e purificação de uma proteína quimérica construída com base em proteínas de Rhipicephalus microplus, BP.IC
+ mais bolsas vinculadas 15/09268-1 - Caracterização de duas proteases do parasita Babesia bovis: importância na infecção de seus hospedeiros., BP.DR
14/22464-1 - Clonagem, expressão e purificação de uma aspartil protease (Rm27441) presente em intestino de carrapato Rhipicephalus microplus, BP.IC
12/20597-9 - Interação de proteases de Babesia bovis, um dos agentes da tristeza parasitária bovina, com inibidores de carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus, e o seu potencial vacinal., BP.PD
13/01175-9 - Estudo funcional do inibidor de protease BmSEI presente no intestino do carrapato Rhipicephalus microplus e sua participação na infecção por Anaplasma marginale., BP.DR
12/15191-3 - Caracterização funcional de inibidores de serinoproteases presentes no mosquito Aedes aegypti infectados e não infectados com o vírus da dengue, BP.PD - menos bolsas vinculadas
Assunto(s):Inibidores de proteases  Enzimas proteolíticas  Vetores de doenças  Ectoparasitoses 
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:anti-hemostaticos | enzimas proteolíticas | hematófagos | inibidores de proteases | Interação vetor-parasita | vetor de doenças | Bioquímica

Resumo

O conhecimento da diversidade de moléculas produzidas por vetores de doenças em resposta aos seus agentes etiológicos é uma estratégia importante para identificar alvos importantes na fisiologia destes animais, que poderão ser utilizados no desenho racional de fármacos e pesticidas. A fim de contribuir nesta área de investigação, o presente projeto tem como objetivo geral entender o papel fisiológico dos inibidores de proteases, enzimas proteolíticas e proteínas hipotéticas identificadas em projetos anteriores (utilizando os seguintes modelos de estudo: Triatoma infestans, um dos principais vetores da Doença de Chagas na América Latina, o mosquito Aedes aegypti, vetor da dengue e o carrapato da espécie Rhipicephalus (Boophilus) microplus, ectoparasita de bovinos) na interação de cada um destes vetores com os seus agentes etiológicos (Trypanosoma cruzi, vírus da dengue e Anaplasma marginale). A experiência do grupo em pesquisa relacionada à estrutura e função de inibidores de proteases e anticoagulantes dos três vetores utilizados neste estudo facilitará a execução do projeto proposto. Para garantir o sucesso deste projeto, os experimentos de infecção dos vetores com os respectivos agentes etiológicos serão realizados em colaboração com pesquisadores que já apresentam experiência comprovada com os modelos de infecção a serem utilizados. Além disto, para obter os resultados esperados, o grupo utilizará as seguintes ferramentas: produção de proteínas recombinantes e anticorpos para estas proteínas, RNA de interferência, transcriptoma, microscopia de fluorescência, análise proteômica, experimentos cinéticos clássicos, experimentos de binding em sistema de plasma ressonância, imunização de bovinos, experimentos larvicidas para Aedes e cultura de células de carrapato e mosquito. O conhecimento gerado neste estudo contribuirá no entendimento do papel de inibidores de proteases, proteases e outras moléculas na interação vetor - agente etiológico, e também contribuirá na formação de recursos humanos, e identificação de moléculas com potencial biotecnológico para os problemas relacionados à pecuária e à saúde pública. (AU)

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Publicações científicas (17)
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
GOMES, CICERA MARIA; DE MORAIS-ZANI, KAREN; LU, STEPHEN; BUARQUE, DIEGO DE SOUZA; CARDOSO BRAZ, GLORIA REGINA; GREGO, KATHLEEN FERNANDES; TANAKA, APARECIDA SADAE; TANAKA-AZEVEDO, ANITA MITICO. Differential transcript profile of inhibitors with potential anti-venom role in the liver of juvenile and adult Bothrops jararaca snake. PeerJ, v. 5, . (12/03657-8, 14/11108-0, 13/05357-4)
SOARES, TATIANE S.; BUARQUE, DIEGO S.; QUEIROZ, BRUNA R.; GOMES, CICERA M.; BRAZ, GLORIA R. C.; ARAUJO, RICARDO N.; PEREIRA, MARCOS H.; GUARNERI, ALESSANDRA A.; TANAKA, APARECIDA S.. A Kazal-type inhibitor is modulated by Trypanosoma cruzi to control microbiota inside the anterior midgut of Rhodnius prolixus. Biochimie, v. 112, p. 41-48, . (12/03657-8, 12/00723-0)
ABREU, PATRICIA A.; SOARES, TATIANE S.; BUARQUE, DIEGO S.; TORQUATO, RICARDO S.; TANAKA, APARECIDA S.. RmKK, a tissue kallikrein inhibitor from Rhipicephalus microplus eggs. Biochemical and Biophysical Research Communications, v. 449, n. 1, p. 69-73, . (05/03514-9, 12/03657-8)
LU, STEPHEN; DA ROCHA, LETICIA A.; TORQUATO, RICARDO J. S.; VAZ JUNIOR, ITABAJARA DA SILVA; FLORIN-CHRISTENSEN, MONICA; TANAKA, APARECIDA S.. A novel type 1 cystatin involved in the regulation of Rhipicephalus microplus midgut cysteine proteases. TICKS AND TICK-BORNE DISEASES, v. 11, n. 3, . (15/09268-1, 12/03657-8, 17/25609-9)
BUARQUE, DIEGO S.; GOMES, CICERA M.; ARAUJO, RICARDO N.; PEREIRA, MARCOS H.; FERREIRA, ROBERTA C.; GUARNERI, ALESSANDRA A.; TANAKA, APARECIDA S.. A new antimicrobial protein from the anterior midgut of Triatoma infestans mediates Trypanosoma cruzi establishment by controlling the microbiota. Biochimie, v. 123, p. 138-143, . (12/03657-8, 12/00723-0)
LU, STEPHEN; SOARES, TATIANE S.; VAZ JUNIOR, ITABAJARA S.; LOVATO, DIOGO V.; TANAKA, APARECIDA S.. Rmcystatin3, a cysteine protease inhibitor from Rhipicephalus microplus hemocytes involved in immune response. Biochimie, v. 106, p. 17-23, . (05/03514-9, 12/03657-8, 09/17589-1)
MANZATO, VERONICA MORAES; SOARES TORQUATO, RICARDO JOSE; ALVES LEMOS, FRANCISCO JOSE; NISHIDUKA, ERIKA; TASHIMA, ALEXANDRE KEIJI; TANAKA, APARECIDA SADAE. versatile inhibitor of digestive enzymes in Aedes aegypti larvae selected from a pacifastin (TiPI) phage display librar. Biochemical and Biophysical Research Communications, v. 590, p. 139-144, . (12/03657-8, 19/03779-5)
SOARES, TATIANE SANCHES; SOARES TORQUATO, RICARDO JOSE; GONZALEZ, YAMILE GONZALEZ; ALVES LEMOS, FRANCISCO JOSE; TANAKA, APARECIDA SADAE. Production of serine protease inhibitors by mutagenesis and their effects on the mortality of Aedes aegypti L. larvae. PARASITES & VECTORS, v. 8, . (09/05405-3, 09/06003-6, 05/03514-9, 12/03657-8)
SOARES, TATIANE S.; OLIVEIRA, FELIPE; TORQUATO, RICARDO J. S.; SASAKI, SERGIO D.; ARAUJO, MARIANA S.; PASCHOALIN, THAYSA; TANAKA, APARECIDA S.. BmTI-A, a Kunitz type inhibitor from Rhipicephalus microplus able to interfere in vessel formation. Veterinary Parasitology, v. 219, p. 44-52, . (02/13960-8, 05/03514-9, 12/03657-8)
SOARES, TATIANE SANCHES; RODRIGUEZ GONZALEZ, BORIS LUIS; SOARES TORQUATO, RICARDO JOSE; ALVES LEMOS, FRANCISCO JOSE; COSTA-DA-SILVA, ANDRE L.; CAPURRO GUIMARAES, MARGARETH DE LARA; TANAKA, APARECIDA SADAE. Functional characterization of a serine protease inhibitor modulated in the infection of the Aedes aegypti with dengue virus. Biochimie, v. 144, p. 160-168, . (12/03657-8, 12/15191-3)
TORQUATO, RICARDO J. S.; LU, STEPHEN; MARTINS, NADIA HELENA; TANAKA, APARECIDA S.; BARBOSA PEREIRA, PEDRO JOSE. High-resolution structure of a Kazal-type serine protease inhibitor from the dengue vector Aedes aegypti. ACTA CRYSTALLOGRAPHICA SECTION F-STRUCTURAL BIOLOGY COMMUNICATIONS, v. 73, n. 8, p. 469-475, . (12/03657-8)
BUARQUE, DIEGO S.; BRAZ, GLORIA R. C.; MARTINS, RAFAEL M.; TANAKA-AZEVEDO, ANITA M.; GOMES, CICERA M.; OLIVEIRA, FELIPE A. A.; SCHENKMAN, SERGIO; TANAKA, APARECIDA S.. Differential Expression Profiles in the Midgut of Triatoma infestans Infected with Trypanosoma cruzi. PLoS One, v. 8, n. 5, . (05/03514-9, 12/03657-8, 07/58973-3, 12/00723-0)
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OLIVEIRA, FELIPE A. A.; BURI, MARCUS V.; RODRIGUEZ, BORIS L.; COSTA-DA-SILVA, ANDRE L.; ARAUJO, HELENA R. C.; CAPURRO, MARGARETH L.; LU, STEPHEN; TANAKA, APARECIDA S.. The first characterization of a cystatin and a cathepsin L-like peptidase from Aedes aegypti and their possible role in DENV infection by the modulation of apoptosis. International Journal of Biological Macromolecules, v. 146, p. 141-149, . (13/16609-4, 12/03657-8)
LU, STEPHEN; ASCENCIO, MARIANO E.; TORQUATO, RICARDO J. S.; FLORIN-CHRISTENSEN, MONICA; TANAKA, APARECIDA S.. Kinetic characterization of a novel cysteine peptidase from the protozoan Babesia bovis, a potential target for drug design. Biochimie, v. 179, p. 127-134, . (15/09268-1, 17/25609-9, 12/03657-8)
KARLA A. OLIVEIRA; RICARDO J. S. TORQUATO; DANIELA C. G. GARCIA LUSTOSA; TALES RIBEIRO; BRUNO W. L. NASCIMENTO; LILIAN C. G. DE OLIVEIRA; MARIA A. JULIANO; THAYSA PASCHOALIN; VIRGINIA S. LEMOS; RICARDO N. ARAUJO; et al. Proteolytic activity of Triatoma infestans saliva associated with PAR-2 activation and vasodilation. Journal of Venomous Animals and Toxins including Tropical Diseases, v. 27, . (12/03657-8)

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