Interação entre HIF-1 e ácidos graxos de cadeia curta no intestino: qual o papel da acetilação de HIF-1?

Resumo

Os ácidos graxos de cadeia curta (AGCCs) são produtos oriundos da microbiota intestinal, sendo produzidos principalmente pela fermentação das fibras alimentares. Encontrados em altas concentrações no cólon, os AGCCs desempenham papel energético fundamental para as células epiteliais, possuem importantes efeitos imunomodulatórios, além de auxiliarem na manutenção da homeostase intestinal através da regulação da proliferação/apoptose das células epiteliais intestinais (IECs) e da produção dos peptídeos de defesa do hospedeiro, efeitos esses que parecem envolver a estabilização da subunidade ± do fator de transcrição induzido por hipóxia 1 (HIF-1). Estudos recentes relacionam o papel energético dos AGCCs com maior ativação (indireta) de HIF-1 nas IECs, não levando em consideração, porém, seus outros mecanismos de atuação. Com isso, este trabalho tem por objetivo investigar a participação e a importância de HIF-1 nos efeitos dos AGCCs produzidos em condições fisiológicas (dietas com diferentes quantidades de fibras) nas IECs, bem como elucidar os possíveis mecanismos de interação direta entre os AGCCs e HIF-1. Para tanto, utilizaremos modelos in vivo (animais com deleção tecido específico de HIF-1± e/ou Vhl) quanto in vitro (organoides intestinais), nos quais faremos análises moleculares incluindo Western blotting, imunofluorescência, RT-PCR, metagenômica de RNA 16S, espectrometria de massa, sequenciamento de RNA, imunoprecipitação de cromatina com posterior sequenciamento (ChIP-Seq), testes com inibidores de HDAC e análises imunohistológicas do intestino após modelo de colite induzida por C. difficile.